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联合应用反相色谱树脂和离子交换树脂分离纯化达托霉素,比较各树脂的载样量、累积洗脱回收率和纯化倍数确定树脂型号。依次采用LP20MM反相色谱树脂、NM-Q离子交换树脂和XT-30反相色谱树脂进行分离纯化,纯化工艺参数:将粗分离发酵液上样于LP20MM反相色谱树脂柱,用10%乙腈溶液洗脱,收集达托霉素纯度大于80%的洗脱液,上样于NM-Q离子交换树脂柱,用10 g/L氯化钠溶液洗脱,收集达托霉素纯度大于90%的洗脱液,上样于XT-30反相色谱树脂柱,用50%乙醇(含乙酸铵40 mmol/L)溶液洗脱,收集达托霉素纯度大于99%的洗脱液,经纯化后达托霉素的纯度达到99.3%,纯化收率为57.5%。