【摘 要】
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目的 观察健脾活血祛湿方对H22肝癌皮下移植瘤裸鼠的影响,探讨其是否通过干预水通道蛋白9(AQP9)蛋白靶点调控肝癌细胞线粒体凋亡途径,从而发挥抗肿瘤的可能机制.方法 采用H22
【机 构】
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贵州中医药大学,贵州贵阳550025
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目的 观察健脾活血祛湿方对H22肝癌皮下移植瘤裸鼠的影响,探讨其是否通过干预水通道蛋白9(AQP9)蛋白靶点调控肝癌细胞线粒体凋亡途径,从而发挥抗肿瘤的可能机制.方法 采用H22肝癌细胞成功建立裸鼠皮下移植瘤模型,选取成瘤裸鼠25只随机分为空白组(生理盐水灌胃,0.2 ml/10 g)、阳性对照组(环磷酰胺腹腔注射,30 mg/kg)和健脾活血祛湿方低、中、高剂量组(灌胃,25、50、100 mg/kg),每组5只,1次/d.计算各组H22肝癌移植瘤裸鼠的抑瘤率及脾脏指数,采用荧光探针JC-1和流式细胞术检测线粒体膜电位(△Ψm)的变化;Westemblot检测瘤组织B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bl-2)、B淋巴细胞瘤因子相关X蛋白(Bax)的表达变化;免疫组织化学检测AQP9表达.结果 与空白组相比,阳性对照组裸鼠的生存状态较差,瘤体体积减小,抑瘤率、Bcl-2、Bax蛋白表达显著增高(P＜0.05,P＜0.01),脾指数、线粒体膜电位水平显著降低(P＜0.01);免疫组织化学结果显示AQP9表达增多.与阳性对照组相比,健脾活血祛湿方高剂量组瘤体体积减小,瘤重和抑瘤率均无明显变化(P＞0.05),脾指数升高(P＜0.05),线粒体膜电位显著降低(P＜0.05),Bcl-2、Bax表达和Bax/Bcl-2比值显著增高(P＜0.05);免疫组织化学结果显示AQP9广泛表达,呈现AQP9棕褐色深染,部分细胞出现胞核的形态改变,细胞空泡显著增多.结论 健脾活血祛湿方在一定剂量下对H22肝癌荷瘤裸鼠有明显的抑瘤作用,并可改善裸鼠免疫功能,其作用可能与调控AQP9干预肝癌细胞线粒体凋亡途径有关.
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