【摘 要】
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该文利用正交试验设计的方法,对落叶松ISSR-PCR反应的5因素4水平进行试验,试验结果运用MINITAB软件进行分析,建立了落叶松ISSR-PCR反应的最佳体系,即在20μl反应体系中,模板5
【机 构】
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中国林科院黑龙江分院,东北林业大学林学院遗传育种室
【基金项目】
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黑龙江省博士后科研启动基金,东北林业大学校科研和教改项目
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该文利用正交试验设计的方法,对落叶松ISSR-PCR反应的5因素4水平进行试验,试验结果运用MINITAB软件进行分析,建立了落叶松ISSR-PCR反应的最佳体系,即在20μl反应体系中,模板50-200ng,0.5 μmol/L的引物,1×反应缓冲液,dNTP为0.15mmol/L-0.2mmol/L,1U的Taq DNA聚合酶,Mg2+2.0mmol/L-2.5 mmol/L.并进一步进行梯度退火试验,找到了最适的落叶松ISSR退火温度为56.4℃.
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