【摘 要】
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目的探讨过氧化氢(H2O2)对肠上皮细胞线粒体DNA(mtDNA)编码的三磷酸腺苷(ATP)合成酶基因的损伤作用. 方法肠上皮细胞株(SW-480)采用4 mmol/L H2O2处理后进行mtDNA的提取,对ATP合成酶的ATPase6亚基、ATPase8亚基基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物直接进行测序;同时于该时相点测定酶活性. 结果 ATPase8亚基基因在8 385~8 5
【机 构】
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730050,兰州军区兰州总医院烧伤整形科,第三军医大学附属西南医院烧伤研究所,
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目的探讨过氧化氢(H2O2)对肠上皮细胞线粒体DNA(mtDNA)编码的三磷酸腺苷(ATP)合成酶基因的损伤作用. 方法肠上皮细胞株(SW-480)采用4 mmol/L H2O2处理后进行mtDNA的提取,对ATP合成酶的ATPase6亚基、ATPase8亚基基因进行聚合酶链反应(PCR)扩增,并对PCR产物直接进行测序;同时于该时相点测定酶活性. 结果 ATPase8亚基基因在8 385~8 543段出现大范围的点突变; H2O2可导致mtDNA突变基因所编码的ATP合成酶活性明显下降. 结论 H2O2可明显损伤mtDNA编码的ATP合成酶基因,这种损伤作用最终导致其编码的酶蛋白活性明显下降.
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