【目的】建立金花茶杂交种质组培快繁技术体系,为优质杂交种质的保存和快繁提供技术支撑。【方法】以凹脉金花茶♀ב烈香’茶花♂（S1）、‘黄樽’薄叶金花茶♀×防城金花茶♂（S2）、防城金花茶♀×越南抱茎茶♂（S3）等3组杂交组合种子的无菌播种苗为材料,研究不同外植体诱导率的差异,杂交组合、基本培养基、生长调节剂种类浓度组合对芽苗增殖和生根的影响,蔗糖浓度对生根率的影响,及不同基质移栽成活率的差异等组培关键技术。【结果】S1、S2、S3等3组杂交组合无菌苗的顶芽平均诱导率为12%,茎段平均诱导率最高,达100%。杂交组合、基本培养基和6-BA对增殖倍数影响极显著,S1、S2、S3杂交组合在培养基B5+6-BA 2. 5 mg/L+IBA0. 05 mg/L上培养40 d,增殖倍数最高,分别为7. 4、6. 6、7. 5倍,芽苗长势好;在MS培养基上芽苗长势不佳,叶片脱落。杂交组合、生根剂种类浓度组合及蔗糖浓度对生根率影响极显著,S1、S2、S3杂交组合在培养基1/2 B5+ABT 1. 0 mg/L+5 g/L蔗糖上,生根率最高,分别为92%、85%、89%。3组杂交组合在V_黄心土∶V_蛭石=3∶1基质上的平均移栽成活率最高,达94%。【结论】无菌播种苗的茎段是金花茶杂交种质离体培养最理想的外植体,最佳增殖和生根培养基分别为B5+6-BA 2. 5 mg/L+IBA 0. 05 mg/L和1/2 B5+ABT 1. 0 mg/L+蔗糖5 g/L,最佳移栽基质为V黄心土∶V蛭石=3∶1,营建组培快繁技术体系是金花茶杂交种质保存和植株高效再生的理想途径。