【摘 要】
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利用葡萄球菌ｐｒｏｔｅｉｎＡ信号序列（ＳＰＡ），我们构建了不同启动子控制的分泌表达质粒。经表达研究，获得了可控性好、表达量高的ＰＬ启动子控制的分泌表达载体。通过菌种的筛选、培养条件和诱导条件的摸
【机 构】
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中国科学院上海生物化学研究所; 中国科学院上海植物生理研究所;
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利用葡萄球菌ｐｒｏｔｅｉｎＡ信号序列（ＳＰＡ），我们构建了不同启动子控制的分泌表达质粒。经表达研究，获得了可控性好、表达量高的ＰＬ启动子控制的分泌表达载体。通过菌种的筛选、培养条件和诱导条件的摸索；获得了能将表达产物的绝大部分分泌到培养液中的大肠杆菌高效外泌表达系统，外泌表达量可达１００ｍｇ／Ｌ（菌浓度为１Ａ６００／ｍｌ）以上，如此高的分泌表达量尚未见文献报道。利用该系统成功、高效地外泌表达了ｐｒｏｔｅｉｎＡ（ＰＡ）、ｐｒｏｔｅｉｎＡ的ＥＤＡ（ＰＡ－ＥＤＡ）和ＡＢＣ（Ｐ－ＡＢＣ）结构域片段、以及ｐｒｏｔｅｉｎＡ和胰岛素样生长因子Ｉ融合蛋白（ＰＡ－ＩＧＦ－Ｉ）等４种产物。经Ｎ端氨基酸序列测定，表明分泌蛋白质的信号肽均在正确位点被加工切除。
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