【摘 要】
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目的 建立体外稳定表达红色荧光蛋白(RFP)的人脑胶质瘤干细胞.方法 将含有RFP基因的慢病毒(RFP-lentivirus)转染体外培养的人脑胶质瘤干细胞SU2,荧光显微镜下观察红色荧光表达情况;流式细胞仪测定转染前SU2细胞、转染后RFP-SU2细胞传代培养20代后红色荧光转染率:动态观察RFP-SU2单细胞的分裂及克隆形成情况；免疫荧光染色检测RFP-SU2细胞CD133、nestin的表达
【机 构】
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341000赣州,赣南医学院第一附属医院神经外科,215006苏州,苏州大学附属第一医院神经外科,215006苏州,苏州大学附属第一医院神经外科,215006苏州,苏州大学附属第一医院神经外科,215
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目的 建立体外稳定表达红色荧光蛋白(RFP)的人脑胶质瘤干细胞.方法 将含有RFP基因的慢病毒(RFP-lentivirus)转染体外培养的人脑胶质瘤干细胞SU2,荧光显微镜下观察红色荧光表达情况;流式细胞仪测定转染前SU2细胞、转染后RFP-SU2细胞传代培养20代后红色荧光转染率:动态观察RFP-SU2单细胞的分裂及克隆形成情况；免疫荧光染色检测RFP-SU2细胞CD133、nestin的表达.结果 RFP-SU2呈悬浮球状生长,RFP呈高表达.转染前SU2细胞的红色荧光转染率仅为1.5％,转染并克隆培养20代后RFP-SU2细胞红色荧光转染率达75％.RFP-SU2单细胞仍可增殖形成脑肿瘤干细胞球,具有自我更新和克隆增殖能力.免疫荧光染色检测显示RFP-SU2细胞中CD133、nestin表达阳性.结论 以RFP为生物标记物的人脑胶质瘤干细胞成功建立,可为将来人脑胶质瘤干细胞的深入研究提供理想的材料。
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