【摘 要】
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目的 研究血管中骨髓间充质干细胞在不同钙化环境中的分化. 方法 应用华法林,维生素K1及维生素D3制作血管钙化模型.造模成功后,分别取正常SD大鼠动脉和大鼠钙化动脉与骨髓间充质干细胞(MSC)共培养,分为3组:正常组:正常动脉+MSC;钙化诱导剂组:钙化诱导剂(地塞米松+β-甘油磷酸钠+ VitC)+正常动脉+MSC;钙化组:钙化动脉+MSC.各组均培养3周,实验第10天时采用酶联免疫吸附试验(E
【机 构】
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430022武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,浙江省台州市第一人民医院神经内科,430022武汉,华中科技大学同济医学院附属协和医院老年科,浙江省台州市第一人民医院神经内科
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目的 研究血管中骨髓间充质干细胞在不同钙化环境中的分化. 方法 应用华法林,维生素K1及维生素D3制作血管钙化模型.造模成功后,分别取正常SD大鼠动脉和大鼠钙化动脉与骨髓间充质干细胞(MSC)共培养,分为3组:正常组:正常动脉+MSC;钙化诱导剂组:钙化诱导剂(地塞米松+β-甘油磷酸钠+ VitC)+正常动脉+MSC;钙化组:钙化动脉+MSC.各组均培养3周,实验第10天时采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测骨保护素(OPG)蛋白分泌情况,3周后倒置显微镜观察各组细胞形态变化,ELISA检测总蛋白含量和碱性磷酸酶(ALP)活性,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组孤独受体2(Ror2) mRNA表达. 结果 钙化组中MSC自发增殖向成骨样细胞分化.与正常组相比较,钙化组中总蛋白含量,骨代谢标志物ALP活性,OPG均明显升高,而Ror2 mRNA表达则显著低于正常组.钙化诱导剂组中MSC未向成骨样细胞分化,与正常组相比,ALP活性无明显差异,但总蛋白含量及OPG均升高,Ror2 mRNA表达则低于正常组.其中,钙化组Ror2 mRNA表达明显低于钙化诱导剂组. 结论 在已钙化血管中,MSC向成骨样细胞转化,加重血管钙化;而当血管尚未发生钙化时,钙化诱导剂未诱导MSC向成骨样细胞分化,而是向平滑肌细胞分化,修复血管,这可能与血管中Ror2表达有关。
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