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探讨miR-27b靶向TET2对ox-LDL诱导的内皮细胞炎症反应和细胞凋亡的影响。
方法双荧光素酶报告基因分析法验证miR-27b对TET2的靶向作用。体外用ox-LDL诱导人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC),分为对照组、ox-LDL组、ox-LDL+anti-miR-con组、ox-LDL+anti-miR-27b组、ox-LDL+pcDNA组、ox-LDL+pcDNA-TET2组、anti-miR-27b+si-con组和anti-miR-27b+si-TET2组。qRT-PCR检测miR-27b和TET2 mRNA的表达水平,MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot检测TET2、Cyclin D1和Caspase-3蛋白的表达水平。
结果TET2是miR-27b的靶基因,miR-27b可负性调控TET2的表达。ox-LDL处理促进HUVEC细胞miR-27b表达,抑制TET2表达。对照组、ox-LDL+anti-miR-27b组,ox-LDL+pcDNA-TET2组和anti-miR-27b+si-con组HUVEC细胞的炎性因子分泌和凋亡率分别显著低于ox-LDL组,ox-LDL+anti-miR-con、ox-LDL+pcDNA组和anti-miR-27b+si-TET2组(P<0.05)。
结论miR-27b通过下调TET2表达促进ox-LDL诱导的内皮细胞炎症反应和细胞凋亡。