【摘 要】
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目的 观察肾素(原)受体(PRR)小干扰RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用及机制.方法 实验研究.将小鼠分为6组:A～E组建立高氧诱导视网膜新生血管动物模型,其中A～D组分别给
【基金项目】
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山东省自主创新重大科技专项计划基金资助项目;
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目的 观察肾素(原)受体(PRR)小干扰RNA(siRNA)对小鼠视网膜新生血管的抑制作用及机制.方法 实验研究.将小鼠分为6组:A～E组建立高氧诱导视网膜新生血管动物模型,其中A～D组分别给予PRRsiRNA质粒、对照质粒、PRRsiRNA质粒联合氯沙坦治疗和氯沙坦治疗,E组不予任何治疗,F组为空白对照组.各组分别于P17时处死小鼠,用视网膜铺片、HE染色方法观察视网膜新生血管生长情况.用免疫印迹法检测各组PRR及ERK1/2的表达情况.用实时PCR方法检测A、B、E、F组中TGF-β1的表达.采用单因素方差分析(LSD法)比较各组视网膜新生血管及PRR、ERK1/2和TGF-β1表达的差异.结果 视网膜灌注铺片显示A、C和D组视网膜新生血管较E组和B组明显减少(F=17.218,P=0.000).A、C和D组突破内界膜的血管内皮细胞数分别为4.47±1.96、4.49±2.53和5.94±2.54,明显少于E组(32.73±6.38)和B组(21.04±5.39).免疫印迹法检测结果显示E组17 d时PRR表达明显高于F组;A组和C组PRR水平明显低于E组,而B组和D组PRR水平与E组相比差异无统计学意义(F=14.584,P=0.000).E组P17时活化的ERKI/2水平明显高于F组;A、C和D组ERK1/2的活化率均明显低于E组;其中A组和C组降低更明显,与D组相比差异有统计学意义(F=11.177,P=0.000).实时PCR结果显示E组小鼠视网膜TGF-β1 mRNA表达水平明显高于F组,A组表达明显降低,而B组与E组无差异(F=12.468,P=0.002).结论 PRR与肾素(原)结合后可独立激活ERK1/2通路,促进视网膜新生血管的生长.PRRsiRNA可明显降低PRR的表达量,减少ERK1/2通路的激活,达到治疗新生血管的目的.
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