鸡类胰岛素生长因子Ⅰ的克隆、表达及其表达产物的生物学活性研究

来源 :中国家禽 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Gerryliu1984
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应用RT—PCR方法对雏鸡肝脏总RNA中鸡类胰岛素生长因子I基因cDNA进行扩增,然后将特异性片段连接到pMD18-T载体,测序结果表明,与已知序列同源性为100%。然后将特异性片段连在pRLC载体上进行表达,经Tricine—SDS—PAGE分析,原核表达产物为7.6ku的重组蛋白,占菌体总蛋白的23%,Western印迹表明重组蛋白具有IGF—Ⅰ抗原活性。表达产物以包涵体形式存在,经7moL/L盐酸胍的变性液溶解及0.5moL/L精氨酸复性液处理,表达产物随后进行脱盐、凝胶层析纯化、MTT法分析其对N
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