【摘 要】
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目的:研究结肠癌干细胞的肿瘤形成价值及其可能的临床价值.方法:对结肠癌干细胞进行无血清培养,以流式细胞仪检测CD133和CD44表达,以5-氟尿嘧啶(5-flurouracil,5-Fu)处理结肠
【机 构】
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南京中医药大学第一临床学院,南京中医药大学第三附属医院,南京市中医院肛肠科六病区全国肛肠医疗中心江苏省中西医结合结直肠癌诊疗中心
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目的:研究结肠癌干细胞的肿瘤形成价值及其可能的临床价值.方法:对结肠癌干细胞进行无血清培养,以流式细胞仪检测CD133和CD44表达,以5-氟尿嘧啶(5-flurouracil,5-Fu)处理结肠癌干细胞并观察其增殖抑制,对结肠癌干细胞进行动物实验以确定其成瘤特征.结果:Hoechest33342染色后,HT-29干细胞相对于HT-29细胞有明显的核拒染现象;流式细胞仪发现HT-29细胞CD133阳性表达比率为44.6%,C D44阳性表达比率为0.6%;而经过培养提纯后的HT-29干细胞CD133阳性表达比率为92.6%,CD44阳性表达比率为97.8%,C D 1 3 3与C D 4 4阳性表达比率显著提高;HT-29干细胞相对于HT-29细胞对5-Fu有明显的耐药作用,HT-29细胞IC50值为1.394μg/m L,HT-29干细胞的IC50值为13.087μg/m L,IC50值有明显的增高在恢复血清培养后,体外增殖活性明显增强;HT-29干细胞体内生长速度比H T-29细胞体内生长速度显著要缓慢,H T-29细胞的肿瘤体积是HT-29干细胞肿瘤体积的两倍多;HT-29干细胞在小鼠富血管区(腋下和腹股沟淋巴结)的生长速率比皮下生长速率有明显的提高,但与HT-29细胞的生长速率还有明显差距.结论:在结肠癌细胞株存在结肠癌干细胞,通过无血清培养能分离出具有干细胞特征的结肠癌干细胞株,结肠癌干细胞对5-Fu具有耐药性,在适当微环境下其能快速生长,转化为成熟的结肠癌细胞,提示了改变结肠癌干细胞微环境可能是防止肿瘤复发的一个途径.
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