黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺癌A549细胞增殖及E-cadherin、 Snai11表达的影响

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目的 研究黄芪建中汤含药血清联合顺铂对人肺癌A549细胞的作用及其对E-cadherin、Snail1表达的影响.方法 黄芪建中汤含药血清联合不同浓度顺铂(0、2、4、8、16、32、64 μg/ml)培养A549细胞株48 h,采用四唑盐比色(MTT)法检测细胞株的增殖抑制率,确定联合顺铂的最佳用药浓度.将A549细胞株随机分为4组,即空白组、中药组、顺铂组、联合组,依次用完全培养基、黄芪建中汤含药血清、顺铂、黄芪建中汤含药血清联合顺铂干预.各组细胞株培养48 h后,进一步采用MTT法检测各组细胞株的增殖抑制率.再通过免疫细胞化学法(IHC)、免疫蛋白印迹(WB)法检测各组细胞株E-cadhenn、Snail1蛋白的表达.最后通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测各组细胞株E-cadherin、Snail1基因的表达.结果 MTT法研究显示,联合用药时顺铂的最佳浓度为8μg/ml;联合组A549细胞株增殖抑制率高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05).IHC和WB法研究显示,联合组A549细胞株中的E-cadherin蛋白表达水平高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05);联合组A549细胞株中的Snail1蛋白表达水平低于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05).RT-PCR法研究显示,联合组A549细胞株中的E-cadherin基因表达水平高于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05);联合组A549细胞株中的Snail1基因表达水平低于顺铂组、中药组、空白组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 黄芪建中汤含药血清联合顺铂能够抑制A549细胞株的增殖,增强人肺癌A549细胞株中E-cadherin蛋白、基因的表达,并降低人肺癌A549细胞株中Snail1蛋白、基因的表达.
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