【摘 要】
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目的探讨Notch信号抑制剂(2S)-N-N-(3,5-氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)与神经营养素受体高亲和力的酪氨酸激酶受体家族(Trks)阻断剂K252a联用对人脑胶质瘤U
【机 构】
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南通市第四人民医院神经外科,江苏大学基础医学与医学技术学院,
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目的探讨Notch信号抑制剂(2S)-N-N-(3,5-氟苯乙酰基)-L-丙氨酰-2-苯基甘氨酸叔丁酯(DAPT)与神经营养素受体高亲和力的酪氨酸激酶受体家族(Trks)阻断剂K252a联用对人脑胶质瘤U251MG细胞的抑制作用。方法应用DAPT和K252a单独或联用处理U251MG细胞,噻唑蓝比色实验检测细胞的活性,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot检测p-TrkA、JNK、p-JNK、Caspase-3、Caspase-9、Bax、Bcl-2和Bcl-xL等蛋白的表达。结果 DAPT和K252a均能呈时间与剂量依赖性抑制体外胶质瘤细胞的活性。K252a200、100和50nmol/L与DAPT 2.5μmol/L联合用药24、48和72h的细胞活力均低于单独使用K252a或DAPT(P<0.05)。两药联用可以增加sub-G1期细胞,即促进细胞凋亡。与K252a100nmol/L或DAPT 2.5μmol/L单用比较,K252a100nmol/L与DAPT 2.5μmol/L联用降低了p-TrkA的量,对于JNK的表达基本没影响,但可增加p-JNK的表达。可活化Caspase-3和Caspase-9,同时减少Bcl-xL的表达,但对Bax和Bcl-2的表达基本没影响。结论 DAPT能抑制U251MG的细胞活性。联合DAPT用药能增强K252a对人脑胶质瘤细胞U251MG的毒性。
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