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目的 构建hsa-microRNA-96-5p down慢病毒表达载体并对其进行鉴定.方法 根据hsa-miR-9-5p基因序列设计合成hsa-miR-96-5p-inhibition-a和hsa-miR-96-5p-inhibition-b,将合成后成对的引物干粉溶解于退火缓冲液中引物退火.将慢病毒GV280载体酶切产物通过T4DNA连接酶将双酶切线性化的载体和退火双链DNA连接.经菌落筛选,菌落PCR及测序鉴定,荧光法及药筛法测定病毒效价.结果 菌落PCR和测序验证成功构建了hsa-miR-96-5p