【摘 要】
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目的比较不同包被材料、不同培养条件对黑素细胞的纯化作用。方法将包皮组织、包皮的表皮组织及消化所得的细胞悬液,分别培养于层黏连蛋白或基质胶包被的培养板中,传代时进行
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(81171516)
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目的比较不同包被材料、不同培养条件对黑素细胞的纯化作用。方法将包皮组织、包皮的表皮组织及消化所得的细胞悬液,分别培养于层黏连蛋白或基质胶包被的培养板中,传代时进行差别胰酶处理、80%~90%融合时加入G418(0.05%)4 min或5-Brd U,通过黑素细胞的标记性抗体HMB-45荧光染色,观察黑素细胞纯度。结果原代培养中,细胞悬液比组织块获得细胞更多更快,单纯表皮比带真皮的组织块更早有细胞迁移并增殖;层黏连蛋白包被比基质胶包被更有利于黑素细胞生长;差别胰酶处理以及加入一定浓度的G418或5-Brd U均可纯化黑素细胞,但G418、5-Brd U浓度较大时对细胞损伤明显。结论采用层黏连蛋白包被板培养包皮来源的细胞悬液,传代时采用差别胰酶处理,传代后加小剂量的G418,有利于黑素细胞纯化,而不影响其生长。
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