体外冲击波联合负载骨髓间充质干细胞的富血小板血浆移植促进骨缺损修复

来源 :中国组织工程研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:douliangster
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背景:节段性骨缺损容易发生不愈合,其治疗是一个巨大的临床挑战.此外,人口老龄化和骨质疏松症相关骨折的增加使得有必要进一步探索这类成骨不良人群骨折愈合的新方法.目的:评估负载骨髓间充质干细胞的富血小板血浆移植结合体外冲击波这种新型联合治疗策略在骨质疏松性骨缺损重建中的作用.方法:将经过体外冲击波预处理的骨髓间充质干细胞与富血小板血浆共培养,通过CCK-8和活死染色法检测细胞生物相容性,通过碱性磷酸酶染色、茜素红染色和RT-PCR检测细胞成骨分化能力.建立骨质疏松新西兰大白兔模型,并制备桡骨节段性骨缺损,使用负载髓间充质干细胞的富血小板血浆移植结合体外冲击波的联合治疗策略,治疗后12周对桡骨样本进行Micro-CT分析和组织学评估骨再生情况.结果 与结论:①在体外,富血小板血浆与体外冲击波联合处理可以促进骨髓间充质干细胞增殖和迁移,加速骨髓间充质干细胞钙化结节的沉积,提高碱性磷酸酶的活性,上调Runx2、骨钙蛋白的表达从而诱导骨髓间充质干细胞成骨分化;②在体内,Micro-CT分析和组织学评估表明负载髓间充质干细胞的富血小板血浆移植结合体外冲击波这种联合治疗策略显著增强了骨质疏松节段性骨缺损的骨再生;③结果 表明,负载骨髓间充质干细胞的富血小板血浆移植结合体外冲击波治疗可以改善骨质疏松相关的不良成骨微环境,增强骨质疏松状态下节段性骨缺损的愈合潜力.
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背景:骨髓间充质干细胞在体外培养传代过程中存在细胞老化现象,但其机制尚不明确.组蛋白去乙酰化酶可以使组蛋白脱乙酰化而使染色质处于浓缩状态,进一步关闭基因.目的:探讨骨髓间充质干细胞衰老过程中组蛋白去乙酰化酶9的表达模式.方法:通过生物信息学挖掘技术分析组蛋白去乙酰化酶在骨髓间充质干细胞中的表达;通过体外传代培养骨髓间充质干细胞,β-半乳糖甘酶染色和qRT-PCR方法检测其衰老状态,qRT-PCR、Western blot及免疫荧光技术检测组蛋白去乙酰化酶9的表达模式.结果 与结论:①数据挖掘、生物信息学分
背景:研究报道整合素靶向肽多巴胺-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(dopamine-arginine-glycine-aspatic acid,DOPA-RGD)可以抑制破骨细胞活化和促进细胞黏附,然而对于整合素靶向肽干预骨髓间充质干细胞或改性钛基材料的最适浓度及最适时间尚不明确.目的:探究DOPA-RGD肽促进大鼠骨髓间充质干细胞增殖的最适干预质量浓度及最适干预时间.方法:体外分离培养SD大鼠骨髓间充质干细胞,选取纯度达标的细胞进行下一步干预实验.96孔培养板中接种第3代骨髓间充质干细胞,对照组细胞培养采用单
背景:前期研究发现,补肾调肝方治疗骨关节炎有明显临床疗效,但缺乏对其作用机制的研究.目的:观察补肾调肝方含药血清对大鼠软骨细胞自噬的影响,并探讨其内在机制.方法:传代培养的第3代大鼠软骨细胞随机分为4组:二甲基亚砜组、10μg/L白细胞介素1β组、10μg/L白细胞介素1β+10%补肾调肝方含药血清组和雷帕霉素5μmol/L组,分别处理软骨细胞24 h.单丹磺酰尸胺染色法检测软骨细胞自噬小体表达;实时荧光定量PCR检测自噬相关基因ATG5、ATG7 mRNA的表达;Western blot检测Beclin
背景:早期自然流产与母胎界面血管形成障碍或异常有关,人脐带华通氏胶间充质干细胞具有向损伤部位迁移及促血管生成的作用,目前人脐带华通氏胶间充质干细胞作用于早期自然流产蜕膜基质细胞的研究尚未有报道.目的:探讨人脐带华通氏胶间充质干细胞对早期自然流产蜕膜基质细胞增殖、凋亡及血管内皮生长因子表达的影响,以及对早期自然流产小鼠妊娠结局的影响.方法:①分离培养早期自然流产和人工流产蜕膜组织,实时荧光定量PCR和Western blot检测蜕膜组织中血管内皮生长因子的表达;②第3代人脐带华通氏胶间充质干细胞和原代自然流
背景:脊髓损伤后胶质瘢痕形成物理屏障抑制轴突跨越损伤部位,被认为是神经修复过程中的不利因素.目的:研究siRNA干扰波形蛋白表达对反应性星形胶质细胞的影响,探讨其在脊髓损伤后胶质瘢痕形成中的意义.方法:①选取生长良好的第3代星形胶质细胞,分为未转染组、siRNA-NC组、siRNA-Vimentin组,利用siRNA干扰技术沉默星形胶质细胞中波形蛋白表达,转染24 h进行波形蛋白免疫荧光染色,采用划痕法观察细胞迁移及增殖情况.②SD大鼠随机分为3组:正常组10只,只打开椎板,不损伤脊髓;模型组20只,制备
背景:骨骺闭合长骨停止生长,骨骺闭合的直接诱因是生长板软骨细胞的凋亡.有报道芳香化酶抑制剂可以抑制雌激素的生成,而骨骼生长的停止是由于骨骺闭合引起的,因此推断芳香化酶抑制剂可以抑制生长板软骨细胞凋亡,延迟骨骺闭合.目的:比较几种芳香化酶抑制剂(白藜芦醇、鹰嘴豆素A、亚麻木酚素)抑制大鼠生长板软骨细胞凋亡的效果,并对白藜芦醇延迟大鼠骨骺闭合促进长骨生长的作用进行验证.方法:解剖大鼠胫骨及股骨生长板软骨,二步酶消化法体外分离获得生长板软骨细胞并进行培养,分别利用倒置相差显微镜及Ⅱ型胶原免疫荧光实验对软骨细胞进
背景:肠道急性移植物抗宿主病是异基因造血干细胞移植后最常见的危及生命的并发症之一,由供体免疫活性T细胞攻击健康受体组织导致,目前治疗方案效果不佳.长链非编码RNA参与免疫反应等多种生物学过程,但在肠道急性移植物抗宿主病中的作用尚不清楚,有待进一步研究.目的:构建肠道急性移植物抗宿主病差异长链非编码RNA和mRNA表达谱,预测其可能的作用及机制.方法:采集4例单倍体造血干细胞移植后肠道急性移植物抗宿主病患者和4名健康志愿者的外周血单个核细胞进行高通量测序,并对差异mRNA进行GO和KEGG富集分析.根据基因
背景:深层肌肉刺激疗法是一种局部振动疗法,可有效缓解因牵拉或劳累所致损伤、乳酸堆积,或筋膜粘连造成的疼痛和功能受限,但其对慢性非特异性腰痛作用的研究报道相对不足.目的:探讨深层肌肉刺激疗法对慢性非特异性腰痛患者腰肌表面肌电变化、步态时空与动力学参数特征的影响.方法:选取2019年2月至2020年6月在盐城市第一人民医院就诊的102例慢性非特异性腰痛患者作为研究对象,采用随机单盲对照试验设计,按随机数字表法分为2组,各51例.对照组予以传统腰椎节段稳定性训练,观察组在传统腰椎节段稳定性训练基础上,给予深层肌
背景:近年来利用环状RNA(circRNA)调控干细胞分化成为新的研究热点,将circRNA负载于骨髓间充质干细胞研究其成骨性能,为研发骨缺损修复新型材料具有重要意义.目的:探讨敲低circRNA mmu_circ_0001775对骨髓间充质干细胞成骨能力的影响.方法:生物信息学分析工具推测miR-335-5p关系最为密切的上游circRNA为mmu_circ_0001775,将敲低mmu_circ_0001775的慢病毒、阴性对照病毒转染至骨髓间充质干细胞.qRT-PCR检测各组细胞成骨诱导7,14 d
背景:老化伴随着多个器官结构和功能的进行性下降,动脉血管的结构和功能在老化过程中受到损害.目的:观察增龄对动脉管壁超微结构的影响.方法:成年SD大鼠5只及老年SD大鼠5只,在大鼠麻醉状态下取髂总动脉,放入戊二醛中固定,利用透射电子显微镜观察髂总动脉内膜和中膜的超微结构.结果 与结论:①成年大鼠髂总动脉内皮细胞间的连接正常;老年大鼠髂总动脉内皮细胞连接间出现较大的间隙;②成年大鼠髂总动脉中膜平滑肌细胞为收缩表型,细胞外基质中有较多的弹性纤维;老年大鼠髂总动脉平滑肌细胞为合成表型,细胞外基质中胶原纤维明显增多