【摘 要】
：
目的 了解用胶原水凝胶为支架构建HBV转染细胞HepG2.2.15的三维(three-dimensiona,3D)培养模型的应用情况.方法 采用扫描电镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)观察水凝胶内胶原纤维的结构特征,以胶原水凝胶为支架建立HepG2.2.15细胞3D培养模型.采用倒置显微镜观察细胞形态特征;采用MTS法和钙黄绿素-AM(Ca-AM)染色法检测细胞的增殖活性;采用ELISA法检测细胞HBsAg、HBeAg的分泌;采用荧光探针PCR法检测HBV DNA的表达.结果 HepG2.2.15细胞在
【机 构】
：
遵义医科大学微生物学教研室,贵州遵义563099
论文部分内容阅读
目的 了解用胶原水凝胶为支架构建HBV转染细胞HepG2.2.15的三维(three-dimensiona,3D)培养模型的应用情况.方法 采用扫描电镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)观察水凝胶内胶原纤维的结构特征,以胶原水凝胶为支架建立HepG2.2.15细胞3D培养模型.采用倒置显微镜观察细胞形态特征;采用MTS法和钙黄绿素-AM(Ca-AM)染色法检测细胞的增殖活性;采用ELISA法检测细胞HBsAg、HBeAg的分泌;采用荧光探针PCR法检测HBV DNA的表达.结果 HepG2.2.15细胞在96孔板胶原水凝胶中能培养45 d,在24孔板内培养则长达160 d,且生长良好,并能维持转染细胞特性,持续分泌HBsAg、HBeAg和HBV DNA.结论 建立的胶原水凝胶HepG2.2.15细胞3D培养模型能长时间维持细胞增殖.
其他文献
目的 观察应用雷珠单抗注射液联合577 nm阈值下微脉冲激光光凝对糖尿病黄斑水肿患者视网膜厚度(central macular thickness,CMT)及黄斑体积(total macular volume,TMV)的影响.方法 选择2017年12月至2018年12月,糖尿病黄斑水肿患者72例72只眼,按随机数字表法分为研究组患者36例,给予雷珠单抗注射液联合577 nm阈值下微脉冲激光治疗;对照组患者36例,给予雷珠单抗注射液治疗.记录治疗后1、3、6及9个月雷珠单抗注射液的平均注射次数、两组患者黄斑
目的 评价2019年中国麻疹风疹实验室网络(China Measles and Rubella Laboratory Network,CMRLN)运转状况.方法 利用中国麻疹监测信息报告管理系统(Measles Surveillance System,MSS)和CMRLN实验室监测数据库,分析CMRLN运转指标和麻疹风疹病例实验室监测结果.结果 2019年全国报告监测病例78 787例,其中散发病例65 507例,散发病例的血标本、病原学标本采集率分别为95.86％,50.16％,3d内送达网络实验室的比
目的 分析老年人群接种流感疫苗后流感样疾病(Influenza-like illness,ILI)经济负担及其影响因素.方法 2020年11月-2021年2月在宁波市江北区两家医院按1∶1匹配选择接种流感疫苗后≥45d(接种组)和未接种流感疫苗(对照组)的≥60岁ILI病例,收集门诊就诊和住院相关费用,比较两组平均(中位数)经济负担,分析ILI经济负担的影响因素.结果 共纳入接种组和对照组≥60岁ILI病例194对.两组ILI病例的例均总经济负担分别为321元、433元(Z=-3.13,P=0.002);
目的 评价老年人联合接种23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)和流感疫苗(Influenza vaccine,InfV)预防社区获得性肺炎(Community-acquired pneumonia,CAP)的效果.方法 利用6种中英文文献数据库,检索截至2021年4月30日关于老年人联合接种PPV23和InfV预防CAP效果的队列研究文献,采用Meta分析计算联合接种的合并风险比(HR).结果 共纳入8篇PPV23与
目的 了解医疗卫生人员2019年度流感疫苗接种率、2020年度流感疫苗接种意愿及其影响因素.方法 采用分层整群抽样方法于2020年11月选取5个省份92所医疗卫生机构的工作人员,开展网络问卷调查,分析2019年度流感疫苗接种率和2020年度流感疫苗接种意愿及其影响因素.结果 在8 975名调查对象中,2019年度流感疫苗接种率、2020年度流感疫苗接种意愿率分别为24.97％、70.23％.Logistic回归分析显示,地区、年龄、文化程度、工作单位、职称、收入是影响调查对象2019年度流感疫苗接种的因素
目的 分析青海省2008年实施扩大免疫规划前后甲型肝炎(甲肝)流行病学特征.方法 通过全国法定传染病报告系统收集青海省2004-2019年甲肝报告病例,比较分析2008年实施扩大免疫规划前后甲肝发病特征.结果 青海省2004-2019年共报告甲肝9 843例,年均报告发病率为10.84/10万,其中2004-2007年、2008-2013年、2014-2019年分别为16.37/10万、12.29/10万、6.08/10万;各市州年均发病率在6.40/10万-15.32/10万之间;0-14岁、15-29
预防接种服务模式是国家免疫规划成功实施的保障,其发展关系着预防接种服务的质量和效率.本文从入户接种、村卫生室集中接种、乡(镇)预防接种门诊接种、规范化预防接种门诊接种和移动预防接种车接种5个方面综述中国预防接种服务模式的发展和应用,分析中国预防接种服务模式未来的发展方向.
目的 探讨细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)在幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)诱导胃上皮细胞NLRP3炎症小体激活中的作用.方法 培养Hp国际标准株NCTC11639和胃黏膜上皮细胞株GES-1.用Hp感染细胞GES-16 h,采用活性氧检测试剂盒检测细胞内ROS;用25 mmol/L的活性氧ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)预处理GES-1细胞30 min,再按照MOI为100:1、200∶1加入Hp与细胞
目的 对浙江省1例输入性罗阿丝虫病患者进行诊断与病原学分析.方法 对患者眼科手术取出的线虫进行形态学、免疫学及分子生物学检测,收集患者临床资料并进行流行病学调查.结果 患者手术中取出的虫体,肉眼及镜检观察无法判断虫种;虫体DNA经PCR扩增,产物序列与罗阿丝虫(GenBank登录号DQ995497.1)的ITS1基因相似性为100％.患者外周血中查见微丝蚴,提取DNA后进行PCR,扩增片段序列与罗阿丝虫(Gen Bank登录号:DQ995497.1) ITS1的相似性为100％.血清丝虫IgG4抗体检测呈
目的 探究异烟肼(INH)对耻垢分枝杆菌(MS) MC2155的基因表达调控水平的干预作用,以期发现INH诱导的耐药基因突变形成的新分子机制.方法 实验组使用1/2最小抑菌浓度(MIC)的INH处理,对照组用相同稀释倍数的二甲基亚砜(DMSO),培养72 h后,提取各组MS MC2155的总RNA,用illumina Hiseq平台进行全转录组测序.用bowtie2软件将测定结果同MS MC2155标准株的参考基因组序列进行比对,获得INH干预前后的差异基因(differ-ent expression g