抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段抗体dsFv VL链的构建、表达和鉴定

来源 :第三军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：konlee53

【摘要】

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目的将抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段（NH-LBP）抗体的Fv L链引入半胱氨酸（Cys）,并表达、纯化。方法应用mega-primer PCR方法,在抗NH-LBP单克隆Fab抗体的轻链基因骨架区中引入编码C

【作者】

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葛晓冬邹佳杨艳丽刘友生

【机构】

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第三军医大学西南医院病理学研究所

【出处】

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第三军医大学学报

【发表日期】

：

2007年14期

【关键词】

：

脂多糖结合蛋白氨基端片段二硫键稳定性Fv抗体半胱氨酸 N terminal fragment of human lipopolysaccharide bin

【基金项目】

：

国家自然科学基金（30400426）,第三军医大学科研创新基金（2004）

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目的将抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段（NH-LBP）抗体的Fv L链引入半胱氨酸（Cys）,并表达、纯化。方法应用mega-primer PCR方法,在抗NH-LBP单克隆Fab抗体的轻链基因骨架区中引入编码Cys的基因序列,将目的序列放入载体pET-28a（＋）,于工程菌BL21star（DE3）中表达及TALON柱芯亲合纯化,通过ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果dsFv VL链的Thr21替换为Cys,扩增出基因片段长约为650bp,经BL21star（DE3）菌表达出相对分子质量约为

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