【摘 要】
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从条纹斑竹鲨中克隆肌钙蛋白基因,在大肠杆菌中进行表达,并检测其抑制血管生长的活性.文献发现人肌钙蛋白(TnI)具有抑制肿瘤血管生成的功能,根据人TnI的基因序列在条纹斑竹鲨
【机 构】
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暨南大学生命科学与技术学院,细胞生物学系(生物医药研究院),广东广州510632
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从条纹斑竹鲨中克隆肌钙蛋白基因,在大肠杆菌中进行表达,并检测其抑制血管生长的活性.文献发现人肌钙蛋白(TnI)具有抑制肿瘤血管生成的功能,根据人TnI的基因序列在条纹斑竹鲨鱼肝脏中克隆出于鲨鱼TnI基因,在大肠杆菌中进行表达,获得重组蛋白,通过MTT实验和鸡胚尿囊膜(CAM)实验验证其抑制血管生长的活性.条纹斑竹鲨TnI的cDNA全长692 bp,其中开放阅读框552 bp(编码具有183个氨基酸多肽).该蛋白与角鲨鲨鱼TnI的氨基酸同源性最高达85.2％,而与人类、鲑鱼、斑马鱼的TnI的氨基酸同源性分别为68.9％,64.5％和62.3％.在大肠杆菌中进行重组表达,纯化获得蛋白,MTT实验证明其具有抑制血管内皮细胞生长的功能,鸡胚尿囊膜实验显示其有抑制血管生长的功能.结论:条纹斑竹鲨TnI具有抑制血管生成的功能.
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