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目的
了解布鲁杆菌在冻存血液中的存活情况。
方法在松原市疾病预防控制中心布鲁杆菌病（简称布病）门诊就诊的人群中，收集有发热症状及有流行病学接触史的患者血液28份（加入到柠檬酸钠抗凝管），-20 ℃保存。对冻存不同时间的血液样本进行布鲁杆菌分离培养，疑似菌落进行革兰染色及镜检，并与布鲁杆菌阳性血清、A因子、M因子进行血清凝集试验；采用多重PCR方法，使用布鲁杆菌属、种的引物对菌株进行鉴定。
结果在冻存时间不同的28份血液中，有5份样本在分离培养后的第4~ 5天出现小菌落。肉眼下，菌落透明湿润或为乳白菌苔，革兰染色均为阴性，可与布鲁杆菌阳性血清、A因子、M因子血清发生凝集，初步判定这5株菌为羊种布鲁杆菌生物3型。5份分离出布鲁杆菌的血液样本冻存时间最长为17 d，最短的6 d。牛、羊种布鲁杆菌多重PCR结果均出现223 bp目的条带，牛种还含有1条488 bp的目的条带，羊种为310 bp的目的条带，5株待测菌株的扩增结果与羊种布鲁杆菌的扩增结果一致。
结论布鲁杆菌可以在冻存血液中存活一定时间，采用多重PCR方法，利用属、种鉴别，可以为布病的诊断与治疗提供依据。