【摘 要】
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目的 探讨miR-103b对肾癌细胞株769-P和ACHN细胞P21蛋白表达的激活作用及对肾癌细胞生长的影响.方法 根据转染RNA不同,将肾癌细胞分为两组,分别转染miR-103b(实验组)和dsCont
【机 构】
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435000,鄂东医疗集团黄石市中心医院泌尿外科肾脏疾病发生与干预湖北省重点实验室
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目的 探讨miR-103b对肾癌细胞株769-P和ACHN细胞P21蛋白表达的激活作用及对肾癌细胞生长的影响.方法 根据转染RNA不同,将肾癌细胞分为两组,分别转染miR-103b(实验组)和dsControl(对照组).实时荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹法分别检测两组细胞中P21、细胞周期依赖性激酶6、细胞周期蛋白D1 mRNA和蛋白的表达.流式细胞术检测两组细胞周期分布.MTT法检测转染后两组细胞活力,集落形成实验检测细胞增殖能力.计量资料以均数±标准差(x-±s)表示,组间比较采用t检验.结果 实时荧光定量聚合酶链式反应结果提示,对照组769-P和ACHN细胞中P21、细胞周期依赖性激酶6、细胞周期蛋白D1 mRNA的相对表达量分别为1.00±0.10和1.02±0.27、1.00±0.08和1.01±0.17、1.01±0.19和1.00±0.02,实验组分别为2.36±0.51和2.03±0.49、0.33±0.20和0.58±0.22、0.48 ±0.11和0.60 ±0.23,两组相比差异具有统计学意义(P＜0.05).蛋白质印迹法检测结果与实时荧光定量聚合酶链式反应检测结果一致.流式细胞术检测结果显示,与对照组相比,实验组769-P和ACHN细胞位于Go/G1期的细胞比例增加(P＜0.05),提示细胞被阻滞于Go/G1期.MTT检测结果显示,与对照组相比,实验组769-P和ACHN细胞活力明显降低.集落形成实验显示,实验组集落形成的数量明显较少,提示细胞增殖能力下降.结论 miR-103b可通过激活肾癌细胞中P21蛋白的表达,阻滞肾癌细胞周期的进展,抑制肾癌细胞的生长,为肾癌的分子靶向治疗研究提供了一定的理论基础.
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