体外观察不同浓度三氧化二砷(As2O3)在不同的诱导时间作用下对3种神经母细胞瘤(NB)细胞株分化与凋亡的作用。
方法采用不同浓度(0、1、3、5、7 μmol/L)的As2O3诱导3组NB细胞株SK-N-SH、SK-N-BE2、SH-SY5Y,在同等条件下分别培养24、48、72 h。采用荧光原位杂交技术、流式细胞术、细胞增殖毒性检测法,检测As2O3对3种NB细胞株的细胞生物学影响。
结果5 μmol/L As2O3诱导72 h后,SK-N-BE2的MYCN基因扩增数量明显减少;相较于低浓度(1 μmol/L)As2O3,随着浓度的增加,3组细胞增殖活力逐渐降低,SH-SY5Y:24 h(chisq=9.666 7,P<0.05),48 h(chisq=9.666 7,P<0.05),72 h(chisq=9.512 8,P<0.05);SK-N-SH:24 h(chisq=10.384 6,P<0.05,),48 h(chisq=8.641 0,P<0.05),72 h(chisq=9.461 5,P<0.05),SK-N-BE2:24 h(chisq=8.435 9,P<0.05),48 h(chisq=8.641 0,P<0.05),72 h(chisq=9.545 5,P<0.05);流式细胞仪检测结果显示,随着As2O3浓度的增加,与空白组相比,细胞早晚期凋亡率明显增加,凋亡率分别为1.6%(0 μmol/L),3.8%(1 μmol/L),6.1%(3 μmol/L),10.4%(5 μmol/L),40.2%(7 μmol/L);细胞周期中G2/M期延长,细胞分裂受到抑制。
结论1.As2O3对NB细胞株具有诱导凋亡,抑制细胞增殖的作用,呈剂量依赖性,不同类型的NB细胞株对As2O3敏感程度不一。2.SK-N-BE2细胞在As2O3诱导后,扩增的MYCN基因具有转阴趋势。3.经As2O3诱导后,3组NB细胞的细胞周期在S期及G2/M期受到阻滞,细胞核酸复制及细胞分裂受到抑制。