一种简单有效的基于阳离子交换层析的重组腺相关病毒纯化方法

来源 :病毒学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：sgrsrg

【摘要】

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本研究旨在探索出一套简单有效的重组腺相关病毒(rAAV)纯化方法,为基因治疗提供有力载体,推进rAAV的基因治疗走进临床。我们选用国际通用的无辅助病毒包装体系,将pAAV-cTnT-eGFP,pAAV-R2C9和pHelper三种质粒共转染HEK 293T细胞系进行病毒包装,并通过荧光显微镜观察包装效率;应用阳离子交换层析法对收获处理后的病毒液进行纯化,包括第Ⅰ轮高pH下的除杂纯化和第Ⅱ轮以严格密集梯度洗脱为特点的进一步纯化。通过SDS-PAGE和Western Blot(WB)对纯化产物进行检测,使用Q

【作者】

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周豪杰王晨旭马强李媛高传玉张守涛

【机构】

：

郑州大学附属人民医院,郑州大学生命科学院

【出处】

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病毒学报

【发表日期】

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2021年3期

【关键词】

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重组腺相关病毒离子交换层析 rAAV纯化

【基金项目】

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国家自然科学基金(项目号:U1604184),题目:VEGF165影响心肌细胞膜L型钙通道电流在缺血再灌注中的机制研究。

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