靶向大鼠AT1-R基因的短发夹RNA重组腺病毒载体的构建及鉴定

来源 :山西医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jimchenstong
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目的利用AdMax腺病毒载体系统构建大鼠AT1-shRNA腺病毒载体并在293细胞中扩增制备重组病毒。方法自先期构建的pGenesil-1-AT1-shRNA真核表达载体中用RT-PCR法扩增出AT1-shRNA片段,将其克隆人PUC18质粒中。酶切构建好的pUC18-AT1-shRNA载体并克隆进入穿梭质粒pDC316中,将构建好的穿梭质粒pDC316AT1-shRNA载体和骨架病毒pBHGlox△1,3Cre共转染293细胞,包装成重组的病毒颗粒,荧光显微镜观察绿色荧光表达。结果经限制性内切酶、PCR
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