【摘 要】
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将结核分枝杆菌H37RV株在苏通培养基内,37℃培养21d,然后将培养物分成上清液(A)、细胞浆(B)和细胞膜(C)蛋白质样品.以pH3.0～10 0的IPG预制胶条等电聚焦电泳为第一向,SDS-PAGE
【机 构】
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中国人民解放军第309医院结核病研究室,中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划);
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将结核分枝杆菌H37RV株在苏通培养基内,37℃培养21d,然后将培养物分成上清液(A)、细胞浆(B)和细胞膜(C)蛋白质样品.以pH3.0～10 0的IPG预制胶条等电聚焦电泳为第一向,SDS-PAGE为第二向进行双向电泳(2-DE)、银染.经扫描、计算机处理.A组份的部分蛋白质斑点采用质谱仪进行蛋白质鉴定.A、B和C 3个组份蛋白质斑点总数分别为907、884和681;3个组份蛋白质分子量分布基本相似,约70.5%～74.4%在10～49kD之间;蛋白质等电点(pH)A、B两组份分布基本相似,约80.9%～83.5%在pH3.0～6.4之间,而C组份pH7.6～10.0之间的蛋白质斑点数比A和B两组分略多;A、B和C 3个组份表达丰度较高的蛋白质斑点数占各组蛋白质斑点总数的比例分别为7.8%、27.4%和2.8%,蛋白质等电点90.0%均分布在pH3.0～6.4范围内.B组份蛋白质分子质量73.1%分布在10～49kD之间,比A、B两组份略高.A组份14个蛋白质斑点经肽质量指纹谱分析,其中,9个点有同源性的或推测的蛋白质功能,5个蛋白质功能不清楚.总之,初步获得了结核分枝杆菌H37RV株在上述体外培养条件下收获的培养物的上清液、细胞浆、细胞膜蛋白质组2-DE图谱及其特点,为该菌功能基因组研究提供蛋白质组信息.
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