【摘 要】
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穿刺巴斯德芽菌专性寄生于根结线虫,是一种极具潜力的根结线虫生防细菌.由于穿刺巴斯德芽菌的寄生特性,目前国内外尚未实现其纯培养,急需开发一种穿刺巴斯德芽菌的定量检
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南海口571101
【出 处】
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中国微生物学会第二届全国芽胞杆菌研究与应用学术研讨会
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穿刺巴斯德芽菌专性寄生于根结线虫,是一种极具潜力的根结线虫生防细菌.由于穿刺巴斯德芽菌的寄生特性,目前国内外尚未实现其纯培养,急需开发一种穿刺巴斯德芽菌的定量检测方法.本文以穿刺巴斯德芽菌16S rDNA特异片段为靶标,通过引物设计与荧光定量PCR反应体系的优化,建立了检测穿刺巴斯德芽菌的荧光定量PCR方法.所选靶点对穿刺巴斯德芽菌具有良好的特异性,该靶点最适退火温度为60℃,正、反引物的最佳浓度搭配为900 nmol/L、300 nmol/L；以Ct值和质粒拷贝浓度对数为坐标轴建立的标准曲线为y=-3.200×LOG(x)+34.43,R2值为0.998,PCR扩增效率为105.4％,对含穿刺巴斯德芽菌孢子的土壤样品检测阈值为2×103个孢子/g土壤.该方法敏感度高、特异性好,能够运用于穿刺巴斯德芽菌的定量检测.
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