基于数字PCR技术的Y染色体微缺失检测方法开发

来源 :湖南师范大学自然科学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jeans

【摘要】

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为验证数字PCR(dPCR)技术在Y染色体微缺失检测中应用的可行性,以无精子区域(Azoospermia factor,AZF)中的AZFa,AZFb及AZFc为靶标,选择特异性引物并验证其有效性,通过退火温度

【作者】

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袁通阔张红国尹焕才刘睿智殷建

【机构】

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上海大学生命科学学院,中国科学院苏州生物医学工程技术研究所,吉林大学白求恩第一医院

【出处】

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湖南师范大学自然科学学报

【发表日期】

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2021年1期

【关键词】

：

数字PCR qPCR Y染色体微缺失 digital PCR quantitative PCR Y chromosome microdeletions

【基金项目】

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国家科技重大专项(2017ZX10302301-003),国家自然科学基金项目(21876198),中国科学院苏州生物医学工程技术研究所自主部署项目(Y95P061P05)

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为验证数字PCR(dPCR)技术在Y染色体微缺失检测中应用的可行性,以无精子区域(Azoospermia factor,AZF)中的AZFa,AZFb及AZFc为靶标,选择特异性引物并验证其有效性,通过退火温度优化去除可能的非特异性扩增,最终通过已知缺失类型的临床样本验证检测方法的灵敏度及准确性。优化后的dPCR方法检测样本的浓度可低至0.1 mg·L-1,该值远低于常规qPCR的检测限(1 mg·L-1),并能够准确反映Y染色体的缺失状况。因此dPCR可准确反映样本中的Y染色体微缺失

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