【摘 要】
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应用RT-PCR技术,从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2 331bp的Vp4全基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中,转化至受体菌株JM109中,通过质粒提取、限制性内切酶酶
【机 构】
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吉林农业大学动物科学技术学院,吉林农业大学菌物研究所
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划)，国家自然科学基金，吉林省科技厅科研项目，吉林省杰出青年科学基金，中国博士后科学基金，吉林农业大学校科研和教改项目
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应用RT-PCR技术,从猪A组轮状病毒总RNA中扩增了2 331bp的Vp4全基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至克隆载体pGEM-T中,转化至受体菌株JM109中,通过质粒提取、限制性内切酶酶切、PCR、序列测定等方法鉴定,构建出重组阳性克隆质粒pGEM-T-Vp4.经DNASTAR软件分析核苷酸和氨基酸序列,结果显示该实验株与黑龙江株和美国株的同源性最高,均达到99%以上,并具有轮状病毒V4全基因的抗原袁位区.
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