【摘 要】
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目的 观察趋化素样因子1(CKLF1)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响,初步探讨其对凋亡抑制基因( Bcl-2)、促凋亡基因(Bax)和半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)表达水平的调控
【机 构】
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解放军总医院血管外科,北京大学人民医院血管外科
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目的 观察趋化素样因子1(CKLF1)对人血管平滑肌细胞(VSMC)增殖及凋亡的影响,初步探讨其对凋亡抑制基因( Bcl-2)、促凋亡基因(Bax)和半胱氨酸蛋白酶(Caspase-3)表达水平的调控.方法 腺病毒介导CKLF1基因修饰VSMC,CCK8法测定其对细胞增殖的影响;流式细胞仪观察细胞周期变化和凋亡情况;实时定量PCR和Western印迹法分别检测细胞内Bcl-2、Bax的mRNA和Caspase-3蛋白的表达情况.结果 观察期内CKLF1基因修饰的VSMC生长增殖被明显促进,24、48和72 h细胞周期S期的比例分别为15.8％±3.4％、25.5％±9.8％和37.2％±3.3％,较对照组细胞内DNA合成活跃(P＜0.05);血清饥饿刺激后CKLF1组各时相细胞凋亡率较对照组明显减少(5.5％±1.3％、7.6％±0.7％和11.4％±5.5％,P＜0.05).作用时间各时相内CKLF1可持续降低Bax mRNA(0.96±0.14、0.61±0.15和0.37 ±0.05)及Caspase-3蛋白(1.94±0.30、1.09 ±0.17和0.73±0.09)的表达,并上调Bcl-2 mRNA(1.59±0.18、2.05 ±0.51和2.96 ±0.27)的表达.结论 CKLF1可诱导人血管平滑肌细胞增殖和抗凋亡,其潜在机制可能与CKLF1上调Bcl-2水平,继而降低Bax和Caspase-3表达有关.
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