论文部分内容阅读
目的 研究华蟾酥毒基对食管癌细胞侵袭转移的影响.方法 分别将食管癌EC-109和Kyse-150细胞分为4组:对照组和3个浓度实验组.对照组加入含有溶媒(0.1％ DMSO)的培养基,低、中、高3个浓度实验组给予25,50,100 nmol· L-1华蟾酥毒基,处理1d.用划痕实验和Transwell小室法检测各组细胞迁移水平和侵袭能力,用免疫印迹实验检测细胞中磷酸化黏着斑激酶Tyr397[p-FAK(Tyr397)]、P53、人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达情况,用实时荧光定量PCR检测各组细胞中上述指标mRNA的相对表达水平.结果 EC-109细胞:以25～100 nmol·L-1的华蟾酥毒基处理1d后,实验组划痕愈合面积约为(9.96±1.17)％ ～ (5.02±0.92)％,侵袭细胞数约为(162.33±12.01)-(42.33±12.50)个;与对照组的(23.80±1.32)％和(254.33±14.01)个相比,差异均有统计学意义(均P＜0.01).低、中、高3个浓度实验组的MMP-2蛋白表达水平分别为0.74±0.04,0.54±0.06和0.44±0.05.中、高2个浓度实验组的MMP-9蛋白表达分别为0.69±0.08,0.52±0.04;这2组的p-FAK(Tyr397)的表达水平分别为0.90±0.08,0.62±0.06;这2组的P53蛋白表达水平分别为1.20±0.06,2.86±0.05;这2组的PTEN蛋白表达水平分别为1.31±0.06,1.53±0.05,与对照组的(1.00±0.00)比较,差异均有统计学意义(均P＜0.01);在同样的处理条件下,实验组上述指标的mRNA的表达变化与蛋白表达趋势相同.Kyse-150细胞:迁移和侵袭能力的改变以及各指标的表达变化与EC-109细胞趋势相同.结论 华蟾酥毒基可能通过上调P53和PTEN表达,下调FAK的磷酸化及其下游分子MMP-2和MMP-9的表达,进而抑制食管癌细胞的迁移和侵袭.