烟草线条病毒RT-PCR检测方法

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根据已报道的烟草线条病毒外壳蛋白基因序列,设计出一对特异性引物,提取大豆病叶的总RNA,反转录成cDNA,PCR扩增出约400bp大小的产物,产物克隆到pGEM-T Easy载体上,转化大肠杆菌DH 5α,抽提的质粒用Not Ⅰ酶切,出现430bp大小的目标插入片段。经序列测定确认了插入片段的大小为404bp。
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