产气荚膜梭菌ε毒素突变基因的表达及其抗体中和效价测定

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cn0531
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为研究突变产气荚膜梭菌ε毒素(mε)的抗体是否具有中和作用,本研究以毒素D型产气荚膜梭菌全基因组DNA为模板,应用重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将ε毒素第106位的组氨酸残基定点突变为脯氨酸残基,扩增出mε基因,使其丧失生物学毒性而保持免疫原性。以pET-28a为表达载体,构建重组表达质粒pET—mε,并转化大肠杆菌,经IPTG诱导表达重组mε蛋白。SDS-PAGE及westem blot分析显示。重组蛋白约39ku.主要以包涵体形式存在。将重组蛋白免疫家兔,所制备的产气荚膜梭菌mε毒素蛋白的抗血清
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