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目的构建携带NGF基因序列的5型腺病毒(adenovirus expressing NGF,Ad-NGF),探讨其在促进大鼠坐骨神经神修复与再生中的作用。方法将NGF基因序列克隆至5型腺病毒穿梭质粒pCA13,并在HEK-293细胞中包装得到重组腺病毒Ad-NGF并测序鉴定。雄性SD大鼠32只,体重180～200g,随机分为4组(n=8)。切断大鼠右侧坐骨神经并缝合,建立坐骨神经损伤模型。模型制备后,A组及C组分别于术侧腓肠肌注射Ad-NGF及不携带NGF基因序列的空腺病毒载体,1×108PFU/次,隔天1次,共3次;B组及D组分别于术侧腓肠肌注射NGF(200U/d)及生理盐水(100μL/d),连续3周。术后第31天检测坐骨神经功能指数、神经电生理检测,取吻合处及其远端1cm坐骨神经,采用RT-PCR及Westernblot技术定量检测大鼠损伤坐骨神经中NGFmRNA及蛋白的表达水平,并行组织学及免疫组织化学、透射电镜观察。结果实验成功构建了携带NGF基因序列的5型腺病毒Ad-NGF。A组坐骨神经功能指数、神经传导速度、诱发电位波幅及潜伏期与B、C、D组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR及Westernblot检测显示,A组NGFmRNA及蛋白表达量与B、C、D组比较,差异均有统计学意义(P<0.05);B、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。组织学及免疫组织化学观察示A组坐骨神经再生情况明显优于其他组。透射电镜观察示A组坐骨神经横切面轴突直径、髓鞘厚度、神经纤维个数与B、C、D组比较,差异有统计学意义(P<0.05);B、C、D组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Ad-NGF提供了一种在周围神经损伤局部获得大量NGF的新方法,且可有效促进大鼠坐骨神经损伤后的修复。