人DC—SIGN的原核表达载体的构建、重组蛋白的表达纯化和鉴定

来源 :武汉大学学报:医学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户:pangyaoyu
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目的:获得纯化的DC—SIGN蛋白,为揭示DC—SIGN参与抗原提呈的机制,探讨宿主细胞DC—SIGN蛋白和HIV、HCV、结核杆菌等病原体的相互作用机制奠定基础。方法:人DC—SIGN的cDNA克降到pGEX—KG表达载体上。转化入E.coli中通过IPTG诱导。过度表达GST-DC—SIGN融合蛋白,并使用Glutathione—Sepharose 4B亲和层析柱提取得到纯化的DC—SIGN蛋白,最后通过SDS-PAGE和Western Blot方法进行检测和鉴定。结果:酶切鉴定证实DC—SIGN基因
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