牛奶中埃谱利诺菌素(eprinomectin)荧光高效液相色谱检测方法的建立

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建立了以多拉菌素(doramectin,DOR)作为内标检测牛奶中埃谱利诺菌素(eprinomectm,EPR)的荧光高效液相色谱(HPLC)检测法.用乙腈作为牛奶中蛋白质的沉淀剂和EPR的提取剂.用ODS-C18固相萃取法对提取的EPR进行纯化.用真空干燥箱对提取和纯化后的EPR进行干燥.在无水条件下,用三氟乙酸酐和N-甲基咪唑作荧光衍生化剂,加入冰醋酸,在加热条件下对干燥后的EPR进行荧光衍生化.用荧光HPLC进行检测,检测条件:流动相为A液(为乙腈与无水甲醇按1:2的比例配制而成)与水之比为98:2,流速为1.0 mL/min,激发波长为366 nm,发射波长为465 nm,进样量为100 μL,柱温为室温.本方法的检测限为0.1 μg/L,在1~40 μg/L血浆的浓度范围内,标准曲线方程为Y=0.178 7x-0.117,R2=0.997;样品的回收率为83.40%~105.65%;变异系数为6.32%~9.05%.结果显示:本方法灵敏度高,干扰少,重复性好.
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