【摘 要】
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目的研究人血管内皮细胞生长因子（human VEGF）在体外培养的小鼠成纤维细胞（NIH3T3细胞）中的基因转移及表达,为血管化组织工程、缺血性疾病的治疗奠定实验基础。方法应用脂质体介
【机 构】
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首都医科大学基础医学院生化与分子生物学系,首都医科大学医学实验测试中心,首都医科大学基础医学院免疫学系
【基金项目】
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北京市科委科技合同项目（954024800）资助
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目的研究人血管内皮细胞生长因子（human VEGF）在体外培养的小鼠成纤维细胞（NIH3T3细胞）中的基因转移及表达,为血管化组织工程、缺血性疾病的治疗奠定实验基础。方法应用脂质体介导的基因转移技术,将含有人VEGF165编码序列的真核表达载体pcDNA/V转染至体外培养的NIH3T3细胞系中。G418筛选出稳定表达重组质粒的细胞克隆,转接于细胞瓶中,培养72 h,同时以G418筛选的pcDNA3.1（＋）阳性细胞克隆和未转染的NIH3T3细胞为阴性对照,取细胞培养上清及细胞裂解液样品进行Western
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