【摘 要】
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目的:构建水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)真核表达质粒.方法:以水痘-带状疱疹病毒基因组DNA为模板,用PCR扩增出约852bp VZV gE片段.将其分别与pUC-T载体连接.经过蓝白筛
【机 构】
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泸州医学院附属医院皮肤人科,四川泸州,646000
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目的:构建水痘-带状疱疹病毒(VZV)糖蛋白E(gE)真核表达质粒.方法:以水痘-带状疱疹病毒基因组DNA为模板,用PCR扩增出约852bp VZV gE片段.将其分别与pUC-T载体连接.经过蓝白筛选后,用双酶切得到目的基因片段,定向克隆到pcDNA3载体中.并用PCR、电泳和基因测序方法鉴定.结果:用PCR方法扩增出与预期大小相符的VZVgE基因片段,蓝白筛选得到白色菌落及pUC-VZV gE载体,用PCR、电泳和基因测序方法证实pcDNA3-VZV gE(pcVZV-E)及pUC-VZV gE构建成功.结论:本试验构建的pcVZV-E真核表达质粒,含有真核表达所必需的启动子等元件.目的基因克隆方向正确,读码框与翻译产物和VZV gE相符合,为进一步研制VZV DNA疫苗提供了有利条件.
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