【摘 要】
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本研究以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,根据已报道的TMVΔMP和CMVΔRep的核苷酸序列设计特异性引物,分别从质粒pBIN-TMVΔMP(i/r)、pBIN-CMVΔRep
【机 构】
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云南农业大学农学院,云南省烟草农业科学研究院
【基金项目】
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中国烟草总公司云南省公司科技计划项目“烟草主要病害的转基因研究”(07A03)
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本研究以在植物体内转录出RNA沉默的高效诱导因子双链RNA(dsRNA)为目标,根据已报道的TMVΔMP和CMVΔRep的核苷酸序列设计特异性引物,分别从质粒pBIN-TMVΔMP(i/r)、pBIN-CMVΔRep(i/r)扩增MP基因、Rep基因,并在pGEM-TEasy载体上将2片段串联起来,再用PCR扩增串联好的正反向MP-Rep基因。正向MP-Rep基因用BamHI和KpnI切下,将所得基因片段与用同样酶切开的含内含子的pKAN-In相连,取名+pKAN;用同样的方法,将反向MP-Rep基因用X
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