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目的 本文旨在建立一种利用孕妇外周血中分选出的胎儿有核红细胞应用于性连锁疾病无创伤性产前诊断的有效方法.方法 10例妊娠8～12周孕妇各取外周血5 mL,淋巴细胞分离液分离外周血、取上层细胞培养后固定、透化、血红蛋白ε链免疫荧光抗体染色.显微操作取阳性细胞,采用单细胞多重置换扩增技术(MDA)进行全基因组扩增,利用全基因组扩增产物为模板,常规PCR检测Alphoid基因片段确定胎儿性别,与B型超声性别诊断比较.结果经培养后所有标本均观察到血红蛋白ε链阳性细胞,即胎儿有核红细胞(fetal nucleated red blood cell,FNRBC).分选出的阳性细胞经全基因组扩增和后续常规PCR检测,结果 显示10例中有6例诊断为男胎,与B型超声结果完全符合.3例为女胎,1例全基因组扩增失败,B型超声诊断4例为女胎.该方法诊断男胎的正确率为100%,诊断女胎的正确率为75%.结论 应用淋巴细胞分离液从孕妇外周血中富集单个核细胞、培养后以ε-血红蛋白抗体为分选标志,结合显微操作技术从母血中挑选出ε-血红蛋白阳性细胞,并通过全基因组扩增可以有效地获取足够量的研究模板,保证后续分析的准确性,且简单、经济、易行,在临床上可应用于性连锁遗传疾病的无创性产前诊断.