大鼠HPRT基因敲除载体的构建

来源 :内蒙古大学学报：自然科学版 | 被引量 : 0次 | 上传用户：fh2029

【摘要】

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根据已知大鼠HPRT基因的外显子序列,从大鼠HPRT基因BAC中用酶切和PCR方法分别分离得到用于构建基因敲除载体的3.0kb和1.7kb的长臂(Long Arm, LA)和短臂(Short Arm, SA),并克

【作者】

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李雪玲扈廷茂

【机构】

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内蒙古大学生命科学学院

【出处】

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内蒙古大学学报：自然科学版

【发表日期】

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2002年6期

【关键词】

：

大鼠 HPRT基因基因敲除载体构建基因表达分子生物学基因重组 rat HPRT geneknock outvector construction

【基金项目】

：

教育部重点研究项目

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根据已知大鼠HPRT基因的外显子序列,从大鼠HPRT基因BAC中用酶切和PCR方法分别分离得到用于构建基因敲除载体的3.0kb和1.7kb的长臂(Long Arm, LA)和短臂(Short Arm, SA),并克隆到pSL1180和pKO中.3.0kb长臂片段包含5′端部分序列和exon1部分序列,1.7kb短臂位于exon 6 和exon 7之间.依次将neor、SA、LA克隆到pBS相应酶切位点,得到pBS-HPRT,再将LA-neor-SA片段由pBS中切出,克隆到pKO的KpnI和NotI位点之

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