【摘 要】
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目的以A10、THP-1及ECV3043种细胞为研究对象,观察氧化型低密度脂蛋白对3种细胞PKC活性的影响。方法用0,10,20,40和80μg/mL oxLDL共孵育24h,PepTag(r)非放射性蛋白激酶检测
【机 构】
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新乡医学院病理教研室; 南华大学附属第三医院内科; 南华大学心血管病研究所; 南华大学心血管病研究所 河南新乡453003; 湖南衡阳421900;
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目的以A10、THP-1及ECV3043种细胞为研究对象,观察氧化型低密度脂蛋白对3种细胞PKC活性的影响。方法用0,10,20,40和80μg/mL oxLDL共孵育24h,PepTag(r)非放射性蛋白激酶检测法对荷脂细胞胞膜中PKC活性进行定性定量检测—琼脂糖凝胶电泳分离磷酸化条带,观察活性变化的趋势,紫外/可见分光光度计检测570nm吸光度,定量酶的绝对活性。结果随着oxLDL浓度的增加,A10细胞膜PKC活性从静息状态的(0.2613±0.0521)units/mL陡增至(0.7685±0.0869)units/mL;THP-1巨噬细胞由(0.0670±0.0091)units/mL增至(0.1357±0.0235)units/mL;ECV304内皮细胞由(0.0550±0.0075)units/mL增至(0.1216±0.0187)units/mL,其中平滑肌细胞膜活性增幅最大。结论oxLDL浓度依赖性的增强平滑肌细胞、巨噬细胞和内皮细胞的蛋白激酶C活性。
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