【摘 要】
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为了更系统的研究病毒在猪肠道内侵入及致病的分子机制,本试验以猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)为模型,应用RNeasy Min Kit从猪IEC中提取细胞总RNA,反转录后
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、兽医生物技术国家重点实验室猪传染病研究室,东北农业大学生命科学学院
【基金项目】
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中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(0302013002),猪流行性腹泻病毒纤突蛋白与宿主蛋白相互作用机制研究, 国家自然基金项目“猪流行性腹泻病毒N蛋白核定位特性及其对宿主细胞周期影响”(31172350)
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为了更系统的研究病毒在猪肠道内侵入及致病的分子机制,本试验以猪小肠上皮细胞(intestinal epithelial cells,IEC)为模型,应用RNeasy Min Kit从猪IEC中提取细胞总RNA,反转录后,利用SMART技术合成双链cDNA(ds-cDNA),通过同源重组的方法构建猪IEC酵母双杂交cDNA文库。结果显示,文库的滴度为8.4×108 CFU/mL,插入的ds-cDNA片段大小为0.5~2.0kb,平均长度约为1.1kb,文库重组率为100%。此文库为筛选与猪腹泻病毒
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