日本血吸虫童虫信号序列捕捉cDNA文库的构建及初步筛选

来源 :中国病原生物学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:oliver777
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目的建立日本血吸虫童虫信号序列捕捉cDNA(SST—cDNA)文库,筛选日本血吸虫病潜在的疫苗候选分子。方法抽提日本血吸虫童虫mRNA,并转录合成cDNA。将纯化的cDNA插入到载体pAPtag2中,构建SST—cDNA文库。将cDNA文库质粒转染到COS7细胞中进行蛋白表达,通过检测转染细胞中胎盘碱性磷酸酶(PLAP)的活性来判定插入的血吸虫童虫cDNA片段中是否带有信号序列。测定阳性克隆中外源性cDNA的核苷酸序,并通过Blast与Gen—Bank、EST数据库进行比对确定其性质。采用快速扩增cDNA
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