鸡白细胞介素-18基因的原核表达及多克隆抗血清的制备

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将编码鸡白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)成熟蛋白的基因亚克隆至原核表达栽体pPROEXTMHT中,构建重组质粒并进行确证性序列测定.然后将重组质粒转化大肠杆菌DH5α并用IPTG于37 C诱导培养.表达的融合蛋白主要以包涵体形式存在,目的蛋白表达量占菌体蛋白的30%.SDS-PAGE和Western blot分析显示,表达的鸡IL-18融合蛋白相对分子质量约为23 000.包涵体被6mol/L盐酸胍裂解后,通过镍离子亲和树脂进行了纯化.用所获得的重组鸡IL-18融合蛋白及其纯化
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