盐酸多西环素对重组质粒pBI-EGFP-hHO-1表达的调控

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目的构建Tet-off调控的血色素氧化酶-1(HO-1)真核表达载体pBI-EGFP-hHO-1,并确定盐酸多西环素对其表达的调控剂量。方法利用分子生物学技术,将hHO-1基因与质粒pBI-EGFP连接构成重组质粒。NheI和MluI双酶切鉴定后采用RT-PCR技术及免疫细胞化学的方法检测其在人肝癌细胞SMMC-7721中的表达情况。利用RT-PCR技术检测Tet-off和pBI-EGFP-hHO-1双转染后不同浓度盐酸多西环素对hHO-1基因mRNA表达量的影响,确定该四环素调控系统的盐酸多西环素诱导量
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