【摘 要】
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目的:观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,探讨其作用机制是否与干预能量代谢相关.方法:6周龄SD雄性大鼠30只,随机分为空白组、丹栀逍遥散水煎剂组(8.99g·kg-1)、西黄丸组(0.55g·kg-1),药物干预7d,分离血清.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,AnnenxinV/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞凋亡,葡萄糖含量检测试剂盒检测细胞内葡萄糖含量,免疫荧光染色法检测细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达情况,Seahorse Xfe细胞能量
【机 构】
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辽宁中医药大学中医学院,沈阳 110032
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目的:观察丹栀逍遥散含药血清对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响,探讨其作用机制是否与干预能量代谢相关.方法:6周龄SD雄性大鼠30只,随机分为空白组、丹栀逍遥散水煎剂组(8.99g·kg-1)、西黄丸组(0.55g·kg-1),药物干预7d,分离血清.噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,AnnenxinV/碘化丙啶(PI)双染色法检测细胞凋亡,葡萄糖含量检测试剂盒检测细胞内葡萄糖含量,免疫荧光染色法检测细胞葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)表达情况,Seahorse Xfe细胞能量代谢分析仪检测细胞胞外酸化率(ECAR)和耗氧率(OCR),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞已激糖酶2(HK2),丙酮酸激酶M2型(PKM2),乳酸脱氢酶A(LDHA)表达.结果:与空白组比较,丹栀逍遥散水煎剂含药血清可抑制MDA-MB-231细胞增殖,15％含药血清干预48 h效果最佳(P＜0.01).与空白组比较,丹栀逍遥散水煎剂组细胞DNA暂停分裂期/DNA合成前期(G0/G1期)上调(P＜0.01),DNA合成期(S期),DNA合成后期/细胞分裂期(G2/M期)下调(P＜0.01);降低MDA-MB-231细胞GLUT1表达;降低MDA-MB-231细胞的基础糖酵解,糖酵解能力值,糖酵解储备值,基础呼吸值,腺苷三磷酸(ATP)产量,储备呼吸值(P＜0.01);下调MDA-MB-231细胞HK2,PKM2,LDHA蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:丹栀逍遥散含药血清能够抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、促进细胞凋亡、使细胞周期阻滞,其作用机制可能与其逆转乳腺癌MDA-MB-231细胞能量代谢重编程有关.
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