【摘 要】
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目的 夹芯式ELISA法检测多黏菌素大肠杆菌耐药性。方法 基于多黏菌素大肠杆菌耐药性产生的原理及大肠杆菌细胞壁中脂多糖LPS受体复合物序列及空间结构设计了9肽和13肽，将9肽包被于96孔板上，然后滴加待检样品，使用羧基端标记生物素的13肽作为一抗，HPR标记的链霉亲和素为二抗，建立了夹芯式ELISIA法并组装了检测试剂盒。除了对实验室纯化的指数期大肠杆菌耐药性阳性样品外，还对土壤、河水、养殖场的粪
【基金项目】
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浙江省重点研发计划项目（2020C02031）；
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目的 夹芯式ELISA法检测多黏菌素大肠杆菌耐药性。方法 基于多黏菌素大肠杆菌耐药性产生的原理及大肠杆菌细胞壁中脂多糖LPS受体复合物序列及空间结构设计了9肽和13肽，将9肽包被于96孔板上，然后滴加待检样品，使用羧基端标记生物素的13肽作为一抗，HPR标记的链霉亲和素为二抗，建立了夹芯式ELISIA法并组装了检测试剂盒。除了对实验室纯化的指数期大肠杆菌耐药性阳性样品外，还对土壤、河水、养殖场的粪样等野外（大田）样品、实验动物饲料原料（蛋黄粉）、实验室动物饮用水进行了检测。结果 利用ELISA检测法，对实验室纯化的指数菌，野外大田试验菌和实验动物饲料原料及饮用水等均能检出，试剂盒的敏感性、特异性、精密性、重复性均达到预期目标。结论 建立的夹芯式ELISIA有可能提升了耐药菌检测的标准化。
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