【摘 要】
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目的:通过体内外实验探讨贝伐单抗对人眼脉络膜黑色素瘤细胞（MUM-2B）血管生成拟态的影响及可能相关的分子通路。方法:通过不同浓度的贝伐单抗（0,0.1,1,2,3 mg/mL）处理MUM-2B细胞，观察其对MUM-2B细胞成管能力的影响。通过CCK-8法及Transwell法检测其对MUM-2B细胞增殖及侵袭的影响。然后，建立裸鼠皮下移植瘤模型，通过不同剂量的贝伐单抗（5 mg/kg, 7.5
【基金项目】
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北京医卫健康公益基金会（编号：HR20002）；
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目的:通过体内外实验探讨贝伐单抗对人眼脉络膜黑色素瘤细胞（MUM-2B）血管生成拟态的影响及可能相关的分子通路。方法:通过不同浓度的贝伐单抗（0,0.1,1,2,3 mg/mL）处理MUM-2B细胞，观察其对MUM-2B细胞成管能力的影响。通过CCK-8法及Transwell法检测其对MUM-2B细胞增殖及侵袭的影响。然后，建立裸鼠皮下移植瘤模型，通过不同剂量的贝伐单抗（5 mg/kg, 7.5 mg/kg, 10 mg/kg）干预，探究贝伐单抗对裸鼠皮下移植瘤VM形成的影响，并通过CD31/PAS免疫组化双重染色法检测VM的表达情况，免疫组化法检测HIF-1a、VE-cadherin、EphA2、PI3K蛋白表达水平变化。结果:体外实验中，不同浓度的贝伐单抗（0,0.1,1,2,3 mg/mL）处理MUM-2B细胞24小时后，对MUM-2B细胞的成管能力、增殖、侵袭能力并没有表现出明显的抑制或促进作用。实验组与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。在体内实验中，贝伐单抗实验组（5 mg/kg, 7.5 mg/kg, 10 mg/kg）与对照组相比较能显著的促进MUM-2B细胞形成VM的能力（P＜0.05）,且形成管道的数量与贝伐单抗的浓度呈正相关（r=0.942,P＜0.05）。实验组HIF-1a、VE-cadherin、EphA2和PI3K-Akt蛋白的表达水平均明显高于对照组（P＜0.05）,且各分子的表达量随着贝伐单抗浓度的升高呈浓度依赖性的升高。结论:体外实验中，贝伐单抗对MUM-2B细胞的成管能力，增殖，侵袭能力并没有表现出明显的抑制或促进作用。体内实验中，贝伐单抗的使用能促进HIF-1a的表达、上调VE-cadherin/EphA2/PI3K-Akt后续的级连信号通路，从而加速VM的生成。
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