Ca^2+信号对肝癌细胞基质金属蛋白酶分泌与活化的影响

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目的 探讨Ca^2+信号调节对肝癌细胞基质金属蛋白酶(MMPs)分泌与活化的影响。方法 在体外人SMMC-7721肝癌细胞培养体系中,引入Ca^2+及其激动剂和抑制剂。应用SDS-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)蛋白电泳和明胶酶谱电泳分析方法,观察肝癌细胞培养上清中MMPs的分泌与活化水平的变化。结果 人SMMC-7721肝癌细胞MMP-2和MMP-9的分泌和活化随着培养体系中Ca^2+浓度升高而升高,在0.8mmol/LCa^2+浓度时,达稳定水平,其中以MMP-2的分泌和活化最明显,较0mmol/L Ca^2+组升高(109.71±27.93)%(P<0.001)。在无血清培养条件下,肝癌细胞分泌蛋白经电泳鉴定结果提示主要为MMPs。细胞内Ca^2+库释放诱导剂毒胡萝卜内酯(Tg,4μmol/L)可明显诱导MMP-2和MMP-9的分泌和活化,MMPs的分泌和活化总量较对照组升高(58.63±31.04)%(P<0.05);而抑制剂S-亚硝基-乙酰青霉胺(SNAP,200μmol/L)则抑制了Tg的诱导作用。结论 肝癌细胞内Ca^2+信号的调控在MMPs的分泌活化过程中发挥重要的作用。

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